一.人硬骨素檢測試劑盒預(yù)期用途：

用于定量測定人血清或血漿中硬骨素的含量.

標(biāo)準(zhǔn)的Wnt信號在通過提高成骨細(xì)胞調(diào)節(jié)骨的穩(wěn)定狀態(tài)起著重要作用。Wnt通路的負(fù)調(diào)節(jié)因子對增強骨重吸收的疾病治療是重要的新的治療目標(biāo)。其中一種就是硬骨素，分子量是22.5 kD的分泌糖蛋白，通過與Wnt-共受體 LRP5的結(jié)合而防止與Wnt 分子的結(jié)合。硬骨素幾乎都是在骨細(xì)胞中產(chǎn)生的。因此認(rèn)為是提供骨特異性的臨床標(biāo)記物。

 二.人硬骨素檢測試劑盒應(yīng)用范圍：

-骨質(zhì)疏松癥

-腫瘤誘導(dǎo)的骨疾病

-風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎

-慢性炎癥

-腎病

-合成代謝治療監(jiān)測

三.人硬骨素檢測試劑盒特征:

方法學(xué)：　三明治夾心法（酶聯(lián)免疫法）

樣本類型：血清,血漿(EDTA, 肝素),尿液

樣本量：　20 µl /每個樣本

檢測范圍：　0-240 pmol/l

檢測限：　2.6 pmol/l

孵育時間：　過夜/ 1 h / 30 min(室溫)

單位換算：　1 pg/ml = 0.044 pmol/l 

四.人硬骨素檢測試劑盒背景介紹：

硬骨素——骨轉(zhuǎn)換的檢測標(biāo)識

骨重建是骨吸收和更新的生命協(xié)調(diào)過程，它在重建骨骼的同時維持其骨架。成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞是專門負(fù)責(zé)這個過程的細(xì)胞。近年來，檢測和塑造參與骨代謝調(diào)控通路的分子，已取得重大進展。這些發(fā)現(xiàn)反過來又促進了反映骨形成或骨吸收的新的生化標(biāo)識物的發(fā)展。這些標(biāo)識物有利于骨代謝疾病和骨質(zhì)疏松癥、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、轉(zhuǎn)移性骨骼疾病藥物發(fā)展的病理生理過程的調(diào)查。

成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞活動的調(diào)節(jié)
 OPG / RANKL/ RANK系統(tǒng)的發(fā)現(xiàn)，地改變了我們對破骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞（1）分化的調(diào)節(jié)機制的理念。 RANKL的檢測，作為破骨細(xì)胞形成和激活的基本細(xì)胞因子，促使阻止RANKL活性療法的發(fā)展，從而抑制骨吸收（2）。使用泛的骨質(zhì)疏松癥的治療，是通過抑制骨吸收減少骨質(zhì)流失，但對增加骨量有輕度影響。 近來發(fā)現(xiàn)的Wnt信號通路和其成骨細(xì)胞活動的調(diào)控，引起了新的促進骨形成治療目標(biāo)的識別（3）。 Wnt信號通路的激活，導(dǎo)致增加擴散和成骨細(xì)胞前體細(xì)胞分化，這有利于新骨沉積和骨質(zhì)密度增加。 當(dāng)相應(yīng)的Wnt信號肽在破骨細(xì)胞膜參與低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白（LRP）5或LRP6和Frizzled信號受體（FZ）（3），結(jié)合輔助復(fù)雜體時，Wnt信號就會觸發(fā)雜。

硬骨素 一種WNT通路的拮抗劑
Wnt信號會被分泌的細(xì)胞內(nèi)抑制劑拮抗，，阻止Wnt-Frizzled-LRP5結(jié)合體的形成。這些拮抗劑可作為骨形成的潛在的治療目標(biāo)。前途的一個目標(biāo)是硬骨素，它已被確定作為Wnt信號通路（4）主要抑制劑之一。對動物以及人類的研究表明，antisclerostin抗體分泌的osteocyte-secreted Sclerostin誘導(dǎo)骨形成。 硬骨素與LRP5和LRP6相互影響，抑制Wnt與其受體結(jié)合，從而阻斷骨形成（圖1）。 硬骨素幾乎*是在骨細(xì)胞中表達(dá)。這些細(xì)胞是的骨細(xì)胞，并擁有mechanosensing appendices，伸入到骨小管（bone canaliculi）系統(tǒng)。作為對機械負(fù)荷的回應(yīng)，骨細(xì)胞分泌細(xì)胞因子，調(diào)節(jié)Wnt信號通路。這些細(xì)胞因子控制的成骨細(xì)胞分化，從而調(diào)節(jié)骨形成（3）。SOST的突變，基因編碼硬骨素，與高骨量混亂關(guān)聯(lián)，常見于障礙見于sclerosteosis和Van Buchems疾病，表明骨細(xì)胞可作為骨形成的主要調(diào)節(jié)因子，本地化的骨重建（5）。

【科學(xué)發(fā)現(xiàn)】
硬骨素在骨細(xì)胞中的生理作用尚未*理解，但眾多的研究表明，硬骨素表達(dá)能降低機械負(fù)荷的存在，終促進成骨增強（6）。硬骨素的表達(dá)下降也會由PTH. Belindo引起，同事已經(jīng)證明小鼠體內(nèi)PTH的慢性海拔降低骨細(xì)胞的硬骨素表達(dá)（7）。在近的一項研究中，血清的硬骨素水平與PTH水平和絕經(jīng)后婦女的自由雌激素指數(shù)呈負(fù)相關(guān)（8）。這些研究結(jié)果表明，血清的硬骨素水平，受雌激素和絕經(jīng)后婦女雌激素兩者調(diào)控。 這些觀察與Mödder和同事的近調(diào)查結(jié)果一致，證明在人體中，雌激素降低循環(huán)硬骨素水平（9）。Gaudio 和同事研究顯示，固定引起的骨質(zhì)流失患者的血清硬骨素水平顯著升高（圖2）。這些數(shù)據(jù)與該假說一致，即硬骨素是體中機械裝卸（mechanical unloading）和廢用性骨質(zhì)疏松（disuse osteoporosis）的紐帶。進一步的研究表明，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的滑膜組織的硬骨素過度表達(dá)。這些結(jié)果表明，炎性細(xì)胞因子可能通過影響Wnt信號通路的調(diào)節(jié)分子（如硬骨素）來促使骨吸收和形成之間的不平衡。Terpos和其同事證明了 在多發(fā)性骨髓瘤患者中硬骨素的作用（12）。 多發(fā)性骨髓瘤患者血清中的硬骨素增加，它與先進的ISS stage相關(guān)，增加骨吸收，降低成骨細(xì)胞功能，難以生存。

【未來展望】
Wnt信號通路及其調(diào)控的分子硬骨素的改變，已被證明在與骨代謝異常有關(guān)的骨質(zhì)疏松癥，多發(fā)性骨髓瘤，骨轉(zhuǎn)移和關(guān)節(jié)炎中發(fā)揮著重要的作用。近發(fā)現(xiàn)的Wnt信號通路，導(dǎo)致新的生物標(biāo)識物的鑒定，如硬骨素，可能有助于了解底層骨形成的調(diào)控機制。從中和抗體到硬骨素的發(fā)展，被認(rèn)為是提高骨吸收疾病非常有前途的治療藥物。基于硬骨素活動拮抗劑的治療，提供了一種強大的方式來恢復(fù)質(zhì)疏松癥的骨骼強度。

【結(jié)論】
測量血清的硬骨素水平的是研究骨量調(diào)控的一個新方法，并可能作為檢測骨骼疾病和監(jiān)測的各種療法效率的工具。